Đề tài“Ứngdụng phương pháp PCR phát hiện vi khuẩn Aeromonas hydrophila phânl ập từ cá tra (Pangasianodon hypophthalmus) bịbệnh xuất huyết” được thực hiện nhằm chuẩn hóa phương pháp PCR phát hiện A. hydrophila. Đồng thờicũng so sánhvớikết quả định danhbằng phương pháp sinh hóa truy ền thống và kit API 20E. Đề tài được thực hiện trên 7 chủng vi khuẩn A. hydrophila phânlập trực tiếptừ cá trabịbệnh xuất huyết ở cáccơ quan (gan, thận vàtỳtạng)của 3tỉnh (Cần Thơ,Vĩnh Long, Đồng Tháp), A. hydrophila được định danhbằng phương pháp sinh hóa truyền thống và kit API 20E sau đó trữ trong glycerol (50%) ở -20oC. Sau khi phụchồi trên môi trường đặc trưng (Aeromonas agar + Ampicillin) tách sang NA và nuôit ăng sinh trong NB, DNA được chiết tách theo Bartie et al(2006),chiếttách bằng 2 cách (chiết táchtừ vi khuẩn nuôi trong NB và vi khuẩn trên đĩa NA pha loãng vớinước muối sinh lý). Phản ứng PCR được khuếch đại DNA theo Panangala etal(2007) có chỉnhsữa bởi Đặng Hoàng Oanh và ctv(2008). Kết quả điện disản phẩm PCRcủa 7mẫu DNA chiết táchtừ NB và 7mẫu DNA chiết táchbằng cách pha loãngv ớinước muối sinh lý, cósự hiện diện của vikhuẩn A. hydrophila, tấtcả đều hiện vạch ởvị trí 209 bp. Điện disản phẩm PCRcủa 7 chủng A. hydrophila mà không quabước chiết tách DNA, do không chiết tách nên phản ứng PCR không khu ếch đại được DNAcủa A. hydrophila, kết quảcả7 mẫu đều không hiện vạch khi điện di. Phản ứng PCR xác định độ nhạy giớihạn thấp nhất có thể phát hiện A. hydrophila là 1ng/µl (hàml ượng DNA). Phương pháp PCRvới hàmlượng thành phần hóa chất tham gia phản ứng và đoạnmồi đặc trưng chỉ cho phép phát hiện A. hydrophila hiệnvạch ở (209 bp), khi thử tính đặc hiệuvới các chủng(Vibrio alginolyticus, Vibrio harveyi, E. ictaluri, Pseudomonas putida, Eschericchia coli).