Khóa luận bước đầu xây dựng quy trình nhuộm nhiễm sắc thể trên tế bào máu thỏ
- Người chia sẻ :
- Số trang : 52 trang
- Lượt xem : 7
- Lượt tải : 500
- Tất cả luận văn được sưu tầm từ nhiều nguồn, chúng tôi không chịu trách nhiệm bản quyền nếu bạn sử dụng vào mục đích thương mại
Bạn đang xem trước 20 trang tài liệu Khóa luận bước đầu xây dựng quy trình nhuộm nhiễm sắc thể trên tế bào máu thỏ, để xem tài liệu hoàn chỉnh bạn click vào nút DOWNLOAD LUẬN VĂN ở trên
Đề tài được thực hiện tại Phòng thí nghiệm Sinh lý Khoa Chăn Nuôi Thú Y, Đại Học Nông Lâm Tp Hồ Chí Minh trên đối tượng thỏ. Nhiễm sắc thể là yếu tố ảnh hưởng đến sự di truyền của một giống loài. Xây dựng được kiểu nhân của một loài là bước đầu cho việc nghiên cứu sâu hơn về cơ chế di truyền của loài đó. Phương pháp hiệu quả nhất trong nghiên cứu kiểu nhân là nuôi cấy tế bào bạch cầu của máu và nhuộm. Máu thỏ nuôi cấy với hai liều lượng là 0,4 ml và 1 ml trong môi trường RPMI 1640 có bổ sung một số chất giúp cho sự sinh trưởng và phát triển tế bào như huyết thanh phôi bò (FBS), Pokeweed (lectin), kháng sinh antimycotic – antibiotic. Mẫu máu được nuôi cấy chủ yếu bằng chai Rough trong 72 giờ ở 37 0 C trong tủ ấm CO2 . Sau 72 giờ, cho thêm 40 µl colcemid vào môi trường và ủ theo ba mức thời gian 20 phút, 40 phút và 60 phút trước khi xử lý để nhuộm. Bên cạnh đó ống nghiệm 15 ml cũng được sử dụng để nuôi cấy thử nghiệm. Kết quả cho thấy khi nuôi cấy 1ml máu thỏ với môi trường RPMI 1640 trong 72 giờ ở 37 0 C và ủ với colcemid trong thời gian 60 phút thì thu được tế bào ở giai đoạn trung kỳ nhiều nhất. Ngoài ra, khi nuôi cấy máu thỏ với ống nghiệm 15 ml vẫn thu được các tế bào ở giai đoạn trung kỳ. Mặc dù vậy, chúng tôi vẫn chưa xây dựng được kiểu nhân (karyotype) của bộ nhiễm sắc thể thỏ do nhiễm sắc thể chưa trãi đều khi nhuộm.
