ĐẶT VẤN ĐỀ Bệnh đái tháo đường đang giữvịtrí thứ3 trong tổng số10 bệnh nan y của nhân loại. Theo sốliệu của Tổchức đái tháo đường quốc tế(IDF), hiện nay trên toàn thế giới có khoảng 246 triệu bệnh nhân đái tháo đường và con sốnày sẽlên đến 380 triệu vào năm 2025. Hầu hết các liệu pháp điều trịtừtrước đến nay đều không thể chấm dứt các biến chứng của bệnh đái tháo đường. Trước tình hình này, các nhà khoa học trên thếgiới không ngừng nỗlực tìm các liệu pháp mới để điều trịbệnh đái tháo đường. Trong đó, liệu pháp tếbào gốc đang rất được quan tâm vì nếu thành công người bệnh sẽkhông còn phải tiêm insulin mỗi ngày, vấn đềthiếu tạng đểcấy ghép cũng được giải quyết và bệnh nhân cũng không cần phụthuộc vào thuốc chống loại thải miễn dịch nữa. Đểhướng đến điều này hiện nay đã có một sốnghiên cứu biệt hóa tếbào gốc thành tếbào tiết insulin. Tuy nhiên, các nghiên cứu này sử dụng các phương pháp biệt hóa khác nhau nhưbiệt hóa bằng dịch chiết tụy chuột [39, 47] hay biệt hóa bằng hóa chất [31, 51, 75]. Nhưvậy, biệt hóa theo phương pháp nào sẽcho hiệu quảtốt hơn? Đểgiải đáp câu hỏi này, đềtài nghiên cứu “Khảo sát khảnăng biệt hóa tếbào gốc trung mô từmáu cuống rốn người thành tếbào tiết insulin bằng hóa chất và bằng dịch chiết tụy chuột” đã được tiến hành. MỤC TIÊU NGHIÊN CỨU – Thực hiện biệt hóa tếbào gốc trung mô máu cuống rốn người thành tếbào tiết insulin bằng dịch chiết tụy chuột – Thực hiện biệt hóa tếbào gốc trung mô máu cuống rốn người thành tếbào tiết insulin bằng hóa chất – Thửnghiệm điều trịbệnh đái tháo đường bằng cách ghép tếbào gốc trung mô máu cuống rốn người hoặc tếbào tiết insulin trên mô hình chuột NỘI DUNG NGHIÊN CỨU Nội dung 1: Khảo sát hiệu quảbiệt hóa tếbào gốc trung mô từmáu cuống rốn người thành tếbào tiết insulin bằng dịch chiết tụy chuột Trong nội dung này, tếbào gốc trung mô máu cuống rốn người được cảm ứng biệt hóa thành tếbào tiết insulin bằng dịch chiết tụy với các nồng độ100 µg/ml, 200 µg/ml, 300 µg/ml, 400 µg/ml, 500 µg/ml và 600 µg/ml. Sau khi biệt hóa, tếbào tiết insulin được xác định thông qua phương pháp nhuộm với DTZ. Hiệu quảbiệt hóa ban đầu được xác định thông qua sốcụm tếbào tiết insulin trong một thịtrường. Nội dung 2:Khảo sát hiệu quảbiệt hóa tếbào gốc trung mô từmáu cuống rốn người thành tếbào tiết insulin bằng hóa chất cảm ứng Trong nội dung này, tếbào gốc trung mô máu cuống rốn người được cảm ứng biệt hóa bằng hỗn hợp hóa chất đặc hiệu theo quy trình thuận và quy trình nghịch. Sau khi biệt hóa, tếbào tiết insulin được xác định thông qua phương pháp nhuộm với DTZ. Hiệu quảbiệt hóa ban đầu được xác định thông qua sốcụm tếbào tiết insulin trong một thịtrường. Nội dung 3: Thửnghiệm điều trịbệnh đái tháo đường bằng cách ghép tếbào gốc trung mô máu cuống rốn người hoặc tếbào tiết insulin trên mô hình chuột Trong nội dung này, chuột đái tháo đường được ghép 5x 10^6 tếbào gốc trung mô máu cuống rốn người (n=3) hoặc 5x 10^6 tếbào tiết insulin (n=3) tiếp cận tụy. Chuột đái tháo đường đối chứng được tiêm PBS (n=3). Sau khi ghép, đo lượng đường huyết, cân nặng của chuột cách mỗi 3 ngày liên tục trong 30 ngày. Sau 30 ngày, thu máu toàn phần đểkiểm tra sựhiện diện của insulin trong máu bằng phương pháp sắc ký lỏng cao áp. Giải phẩu chuột thu nhận tụy đểkhảo sát sựhưhại cũng nhưsự phục hồi đảo tụy thông qua việc đếm sốtếbào đảo tụy bắt màu với DTZ dưới kính hiển vi.